题目内容
λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。 为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。说明怎样处理载体和 cDNA 分子，才能把它们连接到一起。处理过的载体本身能自连吗？cDNA呢？
查看答案
搜索结果不匹配？点我反馈
更多问题
在通用AVG曲线上，可直接查得缺陷的实际声程和当量尺寸。
在WWW环境中，信息是以信息页的形式显示与链接的。
AS公司2012年12月31日发生下列有关经济业务。 (1)2012年12月31日AS公司进行盘点，发现有一台使用中的A机器设备未入账，该型号机器设备存在活跃市场，全新A机器市场价格为750万元，该机器八成新。 (2)AS公司2012年末因自然灾害报废一台B设备，残料变价收入为1000万元。该设备于2009年12月购买，购买价款为8000万元(假定不考虑购买过程中的增值税)，运杂费为640万元，预计净残值为500万元，预计使用年限为5年，采用双倍余额递减法计提折旧。税法规定，企业发生的资产损失，应按规定的程序和要求向主管税务机关申报后方能在税前扣除，未经申报的损失，不得在税前扣除。假定AS公司已向主管税务机关申报，可在税前扣除。 (3)AS公司2012年末C生产线发生永久性损害但尚未处置。C生产线账面成本为6000万元，累计折旧为4600万元，此前未计提减值准备，可收回金额为零。税法规定，企业发生的资产损失，应按规定的程序和要求向主管税务机关申报后方能在税前扣除。未经申报的损失，不得在税前扣除。AS公司未向主管税务机关申报，C生产线发生的永久性损害尚未经税务部门认定。 下列有关固定资产的会计处理，表述不正确的是()。
阅读案例，并回答问题。案例：以下是三位教师在进行“燃烧和灭火”一节的教学时引入环节的设计方案。方案一：教师给学生预备了实验用品，包括：酒精灯、火柴、纸条、煤块、小石块、坩埚钳。教师给学生的任务是：每组从实验用品中选定一种物质为操作对象，在30s内动手让这种物质燃烧，并且当教师数到30s时燃烧要恰好停止。活动结束后，全班交流活动中的感受，讨论：你是怎么让物品燃烧的？燃烧的物品又是在什么情况下熄灭的？燃烧和灭火的条件是什么？方案二：教师向学生展示了多届奥运会火炬的点火方案，如悉尼奥运会的水下点火，我国在珠穆朗玛峰的火炬传递等，同时介绍了不同的点火方案需要攻克的技术难关是什么。进而提出问题：在讨论点火问题时．研究人员必须思考哪些问题？燃烧的条件是什么？方案三：教师向学生演示二氧化碳既生火又灭火的实验：同一个大烧杯中一边放入点燃的蜡烛，另一边放入一块包着淡黄色粉末的脱脂棉，将一集气瓶二氧化碳倾倒入烧杯，蜡烛熄灭，棉花却燃烧起来。教师提出问题，蜡烛为什么会熄灭，棉花为什么会燃烧？燃烧和灭火的条件是什么？请结合上述三个引入方案，回答下列问题：（1）请简析上述三个教学引入方案各自的特点是什么？（2）你认为选取和使用情境素材时应该注意哪些问题？（3）从情境素材的选取和使用方面评价上述三个方案。
微信支付 
支付宝支付