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ColE1 是惟一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。
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某一染色体DNA 经内切酶Sal I 切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA 片段，将这些片段分别在T4 DNA 连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，这些片段都可以进行独立地复制。
现在最常用的pUC 载体是pUC18，它的分子质量小，具有多克隆位点和易于选择的分子标记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA。
质粒ColE1 同pSC101 共整合后，得到的重组质粒pSC134，具有两个复制起始点，这两个起始点在任何细胞中都是可以使用的。
CsCl-EB 密度梯度离心法纯化SC DNA 的原理是根据EB 可以较多地插入到SC DNA 中，因而沉降速度较快。
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