以邻硝基苯酚-β-吡喃半乳糖苷（ONPG）作为反应系统的底物，经过β-半乳糖苷酶作用后，释放出硝基酚（ONP），后者呈（）色。在（）处有吸收峰，也可进行比色测定。酶活力（），释放出的硝基酚越多，黄色越深。