某公司技术人员需要利用凝胶过滤层析法分离纯化不同分子质量大小的蛋白质。实验过程如下：1．试剂：（1）待分离蛋白质样品混合液：含各2～3mg/ml，用氯化钾-乙酸溶液配制A牛血清清蛋白（Mr67000），B鸡卵清蛋白（Mr43000），C胰凝乳蛋白酶原A（Mr25000）和D结晶牛胰岛素（pH2时为二聚体Mr12000）。 （2）0.025mol/L氯化钾-0.2mol/L乙酸溶液（pH=2）（3）Sephadex G-50 2．器材： 层析柱：柱管（直径1.0~1.3cm；管长20~50cm），核酸蛋白检测仪或紫外分光光度计，（ ）， （ ）。3．操作方法：（1）凝胶的处理①（ ）；②（ ）。（2）（ ）：首先将柱垂直地安装好，检查层析柱（ ）。关闭层析柱出水口，并向柱管内加入约（ ）柱容积的洗脱液，然后将浓浆状的凝胶连续地倾入柱中，自然沉降，待凝胶沉降约2～3cm后，打开柱的出口，调节合适的流速，使凝胶继续沉集，待沉集床面上升到离柱的顶端约 2~3cm处时停止装柱，关闭出水口。（3）（ ）：接着再通过 1.5～3 倍柱床容积的洗脱液（ ）使柱床稳定，平衡完成的标准：（ ）（4）（ ）：夹紧上、下进、出水口夹子，关闭恒流泵，吸出层析柱中多余液体直至与胶面相切。沿管壁将样品溶液小心加到凝胶床面上，打开下口夹子，使样品溶液流入并收集流出液，当样品溶液流至与床面相切时，夹紧下口夹子。按加样操作，用1ml洗脱液冲洗管壁2次。最后加入3～4ml洗脱液于凝胶上，将进水口连洗脱瓶，层析柱出水口与 自动收集器 相连。（5）（ ）：洗脱液应与凝胶溶胀所用液体相同。洗脱时，打开上、下进出口夹子，以每管3ml/10min流速洗脱，用试管收集流出液。4．结果： 根据待分离蛋白质的分子量大小的性质[A牛血清清蛋白（Mr67000），B鸡卵清蛋白（Mr43000），C胰凝乳蛋白酶原A（Mr25000）和D结晶牛胰岛素（pH2时为二聚体Mr12000）]，分析该实验条件下蛋白质从层析柱洗脱下来的顺序（ ）。